熒光定量Q-PCR檢測是利用熒光信號的變化實時檢測PCR擴增反應中每一個循環擴增產物量的變化，通過Ct值和標準曲線的關系對起始模板進行定量分析。

　　它的擴增曲線反應了Q-PCR動態進程的曲線。

　　熒光閾值：前15個循環信號作為熒光本底信號，熒光閾值的默認設置是3-15個循環的熒光信號的標準偏差的10倍，如果手動設置則設置大于熒光背景值和陰性對照的熒光高值，進入指數期的初階段。

　　CT值：PCR擴增過程中，擴增產物的熒光信號達到設定的閾值時所經過的擴增循環次數。

　　Q-pcr的取樣及運輸事項：

　　一、細胞收集及保存

　　1.貼壁細胞胰酶消化后900轉5min離心至管底（非貼壁細胞直接離心），棄上清，將細胞凍存與-80度長期保存，-20度，暫時保存。若用于Q-PCR盡量使用滅菌無RNA酶離心管，RNA樣本保存液中-80度長期保存。

　　2.組織樣本取樣后立即-80或者液氮保存。后續用于Q-PCR的取樣后立即存于液氮或者-80度環境中，或者放于有RNA樣本保存液的滅菌無RNA酶離心管中-80度保存。

　　二、樣本運輸

　　短時2h左右冰袋或者液氮運輸，干冰（干冰可以維持-70度）密封運輸。

　　三、樣本編號

　　樣本標號清晰，須提供樣本清單。

　　病理實驗取樣及實驗注意事項：

　　1.動物組織提取后（玉米粒大小即可）迅速保存于4%多聚甲醛中固定，管體標號，組織塊盡量少帶血液，或可以用多聚甲醛將樣本稍作清洗，常溫保存，常溫運輸。做電鏡的樣本由2.5%戊二醛固定于15ml離心管內，樣本直徑小于2mm，常溫保存常溫運輸。

　　2.細胞樣本制作成爬片后PBS浸潤保存與細胞培養板內，密封常溫運輸。做電鏡的細胞離心收集好后2.5%戊二醛固定，常溫運輸。